近日某食品公司在欧洲多国预防性召回一批婴儿配方奶粉,因其供应商提供的某一种原料可能存在一种源自蜡样芽孢杆菌的细菌源性物质。这让“隐形刺客“——蜡样芽胞杆菌,备受食品监管部门和消费者的关注。
为什么叫它“隐形刺客“呢?
蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种在自然界广泛存在的条件致病菌,在恶劣环境下(高温、干燥)能形成芽胞,一旦条件适宜,就能迅速繁殖并释放毒素。但被其污染的食物,在外观和气味上,通常没有明显变化,不易被人察觉。除了“隐形刺客”这个名号外,它还因引起“炒饭综合征”而被人熟知,所谓“炒饭综合征”是指因米饭等存放不当,导致呕吐毒素大量累积而引发的急性中毒事件。
蜡样芽孢杆菌产生的呕吐毒素cereulide,是由12个氨基酸组成的环状缩酚酸多肽,具有很高的耐热性(121℃加热 90 min仍不失活),一旦形成便难以通过常规灭菌手段去除。有论文指出,当摄入0.02-1.83μg的cereulide,就达到呕吐毒素中毒的剂量[1]。由于该毒素分子量较小且免疫原性较弱,难以利用抗体识别等常规生物学手段检测,因此需要依赖高灵度的仪器分析法。
蜡样芽孢杆菌及其毒素的检测方法有不少,有标准培养法(ISO7932),分子生物学方法(PCR/qPCR),免疫学快速检测(如ELISA、侧流层析试纸条)等,其中,液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)是可以直接检测蜡样肽毒素的“金标准”,定量准确、灵敏度高。国际标准组织ISO 2017年发布的《Microbiology of the food chain- Quantitative determination of emetic toxin (cereulide) using LC-MS/MS》(BS EN ISO 18465:2017)中,推荐了使用HPLC-MS/MS或UHPLC-MS/MS来检测食品中呕吐毒素(cereulide)。检测过程涉及的试样制备、提取、净化,流动相配制等多个关键步骤都必须使用超纯水。
为什么需要使用超纯水呢?
UHPLC-MS/MS是一种极其灵敏的分析技术,如果实验用水中含有微量杂质,都会干扰检测结果的准确性和仪器的稳定性。
水中杂质对UHPLC-MS/MS检测呕吐毒素的影响:
- 背景噪音增加:水中的有机微量杂质会在总离子流图(TIC)中产生很高的背景噪声,降低信噪比(S/N),导致无法达到标准要求的检出限。
- 离子竞争干扰:水中含有微量的无机盐(如钠、钾、钙离子),会干扰毒素分子的离子化过程,造成定量不准。
- 对液相色谱柱的影响:
有机物积聚:水中的残留有机物(TOC)可能会在色谱柱头上富集,改变固定相的性质,导致保留时间漂移或出现鬼峰。
颗粒物堵塞:颗粒杂质会堵塞色谱柱和进样器针座,增加系统压力,缩短色谱柱使用寿命
因此,要获得可信赖的检测结果,让这位隐形刺客无处遁形,需要使用品质可靠的实验室超纯水机。为适合这个应用,乐枫推荐使用Genie G超纯水/EDI纯水一体机。
1、它可稳定制备符合UHPLC-MS/MS检测要求的高品质超纯水:
电阻率:18.2 MΩ·cm @25℃
TOC (总有机碳): <2 ppb
颗粒:无粒径超过0.22 µm的颗粒
2、全过程监控,水质可靠,保证检测的准确性、稳定性和重复性
3、EDI技术,有效去除离子和有机物杂质,尤其是难去除的低价弱电离子和小分子量的带电有机物,确保产水水质稳定可靠
4、融合物联网技术,使用和维护方便
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[1] Ceuppens, S., Rajkovic, A., Heyndrickx, M., Tsilia, V., van de Wiele, T., Boon, N. and Uyttendaele, M. (2011) Regulation of Toxin Production by Bacillus cereus and Its Food Safety Implications. Critical Reviews in Microbiology, 37, 188-213.